Исследование взаимодействия кофермента пиридоксаль-5'-фосфата с L-лизином в водном буферном растворе
Работа посвящена обязательному компоненту активного центра многих ферментов в реакциях метаболизма аминокислот - пиридоксаль-5'-фосфату.
Авторы
Тэги
Тематические рубрики
Предметные рубрики
В этом же номере:
Резюме по документу**
УДК 544.355-122:547.466 В.Г. Баделин, Е.А. Венедиктов, В.П. Баранников ИССЛЕДОВАНИЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ КОФЕРМЕНТА ПИРИДОКСАЛЬ-5'-ФОСФАТА С L-ЛИЗИНОМ В ВОДНОМ БУФЕРНОМ РАСТВОРЕ (Институт химии растворов РАН, г Иваново) E-mail: vgb@isc-ras.ru Спектрофотометрическим методом изучено взаимодействие пиридоксаль-5'фосфата с L-лизином в водном буферном растворе при pH=7,35. <...> Показано, что взаимодействие является многостадийным процессом, приводящим к образованию основания Шиффа. <...> Пиридоксаль-5'-фосфат является обязательным компонентом активного центра многих ферментов в реакциях метаболизма аминокислот. <...> Известно, что во всех пиридоксальфосфатзависимых реакциях аминокислот начальным этапом является образование основания Шиффа. <...> При протекании данной реакции in vitro выделяют несколько стадий процесса: разрыв внутримолекулярной водородной связи (кето-енольная таутомерия) [1], образование промежуточного продукта – карбиноламина [2] и, наконец, образование основания Шиффа [3]. <...> Особенностью реакции с лизином является участие аминогруппы в ε-положении в отличие от α-аминокислот. <...> Водный буферный раствор с концентрацией Na2HPO4 0,25488 моль/л и 0,18793 моль/л NaH2PO4 обеспечивал постоянство кислотности среды pH=7,35 в условиях эксперимента. <...> Зависимость выхода основания Шиффа от концентрации лизина измеряли через 12 часов после приготовления растворов при комнатной температуре (20оС). <...> Измерение скорости накопления основания Шиффа проводили в зависимости от температуры через 100 – 200 с после смешения термостатированных растворов ПОФ (3,89·10–4 моль/л) и лизина (4,89·10– 4 моль/л) в объемах 0,5 и 2,0 мл соответственно. <...> Электронные спектры поглощения записывали на двухлучевом спектрофотометре SPECORD – M 40 в интервале длин волн от 337 до 600 нм с использованием кювет из кварца размером 1Ч1 см. Изменение разностного электронного спектра поглощения во времени проводили через 20 с после смешения растворов. <...> РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ (3) (3) Измерения электронных спектров поглощения <...>
** - вычисляется автоматически, возможны погрешности
Похожие документы: