СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ФЛЮОРЕСЦЕНТНЫХ КРАСИТЕЛЕЙ МИТОХОНДРИЙ В СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТКАХ
На культурах мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток из жировой ткани человека исследованы специфические флюоресцентные митохондриальные красители JC-1, MitoTracker Red FM и MitoTracker Red CMXRos. В статических и динамических экспериментах показана зависимость накопления этих красителей в митохондриях и цитоплазме от потенциала митохондрий при действии разобщителя окислительного фосфорилирования СССР. Краситель JC-1 более других подвержен обесцвечиванию при многократной экспозиции даже малыми дозами лазерного излучения, что необходимо учитывать при динамических экспериментах на живых клетках. Кроме того, этот краситель требует двухволновой регистрации в красной и зеленой областях спектра. MitoTracker Red FM устойчив к обесцвечиванию, как и MitoTracker Red CMXRos, однако интенсивность флюоресценции последнего отражает не только потенциал митохондрий. MitoTracker Red CMXRos ковалентно связывается с сульфгидрильными группами липидов и белков митохондрий, что может привести к неправильной трактовке зависимости его флюоресценции от потенциала.
Авторы
Тэги
Тематические рубрики
Предметные рубрики
В этом же номере:
Резюме по документу**
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА
ФЛЮОРЕСЦЕНТНЫХ КРАСИТЕЛЕЙ МИТОХОНДРИЙ
В СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТКАХ <...> М.В.Ломоносова;
**ГНЦ РФ Институт медикобиологических проблем РАН;
***Институт морфологии человека РАМН, Москва
На культурах мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток из жировой ткани человека исследованы
специфические флюоресцентные митохондриальные красители JC1, MitoTracker Red FM и MitoTracker Red
CMXRos. <...> В статических и динамических экспериментах показана зависимость накопления этих красителей в
митохондриях и цитоплазме от потенциала митохондрий при действии разобщителя окислительного фосфори
лирования СССР. <...> Краситель JC1 более других подвержен обесцвечиванию при многократной экспозиции даже
малыми дозами лазерного излучения, что необходимо учитывать при динамических экспериментах на живых
клетках. <...> Кроме того, этот краситель требует двухволновой регистрации в красной и зеленой областях спектра. <...> MitoTracker Red FM устойчив к обесцвечиванию, как и MitoTracker Red CMXRos, однако интенсивность флюорес
ценции последнего отражает не только потенциал митохондрий. <...> MitoTracker Red CMXRos ковалентно связывается
с сульфгидрильными группами липидов и белков митохондрий, что может привести к неправильной трактовке
зависимости его флюоресценции от потенциала. <...> Ключевые слова: митохондрии, флюоресцентные красители, JC1, MitoTracker, конфокальная микро
скопия
Родамин 123 является одним из первых мито
хондриальных красителей, чувствительных к из
менению потенциала. <...> Однако, несмотря на то
что он легко проникает через клеточную мембра
ну, он также легко отмывается. <...> Среди них большой
популярностью в исследовательской практике
пользуются JC1, MitoTracker Red FM и MitoTracker
Red CMXRos (“Invitrogen”). <...> Таким образом,
для изучения потенциала митохондрий требует
ся измерение соотношения флюоресценции в
красной и зеленой областях [3]. <...> MitoTracker Red FM также является потен
циалзависимым красителем, однако в отличие
от JC1 не требует регистрации в двух областях. <...> При фиксации <...>
** - вычисляется автоматически, возможны погрешности
Похожие документы: