ПОДДЕРЖАНИЕ ВЫСОКОГО УРОВНЯ ЭКСПРЕССИИ ЦИТОХРОМОВ Р450 В КЛЕТКАХ В СОСТАВЕ СФЕРОИДОВ HepaRG В СРЕДЕ БЕЗ ДИМЕТИЛСУЛЬФОКСИДА
Изучено влияние ДМСО и фибробластов при формировании сфероидов из клеток линии HepaRG и условий их дальнейшего культивирования на уровень мРНК основных цитохромов Р450. Разработан протокол формирования сфероидов из дифференцированных клеток HepaRG и их культивирования в среде без сыворотки и ДМСО.
Авторы
Тэги
Тематические рубрики
Предметные рубрики
В этом же номере:
Резюме по документу**
138
Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2016, Том 161, 1
ПОДДЕРЖАНИЕ ВЫСОКОГО УРОВНЯ ЭКСПРЕССИИ
ЦИТОХРОМОВ Р450 В КЛЕТКАХ В СОСТАВЕ
СФЕРОИДОВ HepaRG В СРЕДЕ
БЕЗ ДИМЕТИЛСУЛЬФОКСИДА <...> *ООО НТЦ “БиоКлиникум”, Москва, РФ; **ФГБУ НМИРЦ Минздрава РФ, Москва;
***ФГБОУ ВПО Университет машиностроения (МАМИ), Москва, РФ
Изучено влияние ДМСО и фибробластов при формировании сфероидов из клеток линии
HepaRG и условий их дальнейшего культивирования на уровень мРНК основных ци
тохромов Р450. <...> Разработан протокол формирования сфероидов из дифференцированных
клеток HepaRG и их культивирования в среде без сыворотки и ДМСО. <...> Ключевые слова: HepaRG, дифференцировка, цитохромы Р450
Клетки линии HepaRG способны дифференциро
ваться in vitro и обладают основными характери
стиками зрелых гепатоцитов человека, включая
экспрессию цитохромов семейства Р450, фермен
тов II фазы метаболизма, транспортеров и ядер
ных рецепторов [1]. <...> Для дифференцировки и достижения опти
мальной экспрессии ферментов метаболизма
клетки HepaRG культивируют в высокой плотно
сти (в монослое) в присутствии ДМСО (12%). <...> Так, в присутствии ДМСО основной цитохром пе
чени Cyp3A4 не отвечает на воздействие стан
дартных индукторов, фенобарбитала и рифампи
цина, а при отмене ДМСО происходит значитель
ное снижение активности цитохромов. <...> Следова
тельно, для создания модели, содержащей функ
циональные гепатоциты [1,4], необходимо подо
брать оптимальные условия культивирования. <...> Для поддержания и
длительного сохранения функциональной актив
ности 3Dмоделей печени используют несколько
подходов или их сочетание: культивируют сфе
роиды в средах со смесью факторов, гормонов,
антиоксидантов без добавления сыворотки/ком
понентов животного происхождения (“Biopredic”,
“Life Technologies”, “PromoCell”); включают в со
став сфероидов непаренхимные клетки печени
(клетки эндотелия сосудов, звездчатые клетки,
клетки Купфера), способные формировать вне
клеточный матрикс <...>
** - вычисляется автоматически, возможны погрешности
Похожие документы: