ПОЛУЧЕНИЕ И СВОЙСТВА ВАКЦИННОГО ШТАММА ТУЛЯРЕМИЙНОГО МИКРОБА БЕЗ ОДНОЙ КОПИИ ГЕНА IGLC И БЕЗ ГЕНА RECA

Используемая в России для профилактики туляремии живая вакцина на основе штамма Francisella tularensis subsp. holarctica 15 линии НИИЭГ является высокоэффективной, однако проявляет определенную реактогенность и нестабильность. Поэтому разработка стабильной живой туляремийной вакцины с минимальным побочным действием остается актуальной проблемой. Методом аллельного обмена в вакцинном штамме F. tularensis проведено удаление одной копии гена iglC, продукт которого необходим для внутриклеточного размножения вакцинного штамма, и гена recA, играющего ключевую роль при гомологичной рекомбинации. Для замены интактных участков хромосомы F. tularensis на модифицированные сконструировали суицидный вектор pGM5 на основе бирепликонной плазмиды pHV33. Модифицированные фрагменты хромосомы содержали участок ДНК F. tularensis без структурной части гена iglC размером 545 п.о. (в плазмиде pGM∆iglC) и участок ДНК без структурной части гена recA размером 1060 п.о. (в плазмиде pGM∆recA) соответственно. По сравнению с вакцинным штаммом 15 сконструированный мутант 15/23-1ΔrecA размножался в макрофагоподобных клетках линии J774A.1 в 8-10 раз медленнее. Мыши линии BALB/c на иммунизацию штаммом 15/23-1ΔrecA реагировали меньшим снижением веса (~ 2 %), чем на штамм 15 (~ 14 %). Бактерии штамма 15/23-1ΔrecA практически не высевались из селезенок мышей BALB/c через 14 сут после заражения, в то время как бактерии штамма 15 обнаруживали в органах и на 21-е сутки. Штамм F. tularensis 15/23-1ΔrecA, обладающий сниженной реактогенностью, можно использовать в качестве основы для создания стабильной и безопасной живой туляремийной вакцины.

• Дятлов И.А.
• Бахтеева И.В.
• Вахрамеева Г.М.
• Комбарова Т.И.
• Кравченко Т.Б.
• Миронова Р.И.
• Мокриевич А.Н.
• Павлов В.М.
• Титарева Г.М.

• Искусство. Декоративно-прикладное искусство. Фотография. Музыка. Игры. Спорт

• Естественные науки
• Науки о человеке