ОБ ИСПОЛЬЗОВАНИИ СЕРОЛОГИЧЕСКИХ И МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ПРИ ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННОЙ АНЕМИИ ЛОШАДЕЙ

Инфекционная анемия лошадей (ИНАН) — вирусная болезнь однокопытных, вызываемая РНК-содержащим вирусом из рода Lentivirus семейства Retroviridae. Она сопровождается поражением органов кроветворения и проявляется рецидивирующей или постоянной лихорадкой, анемией и нарушением функций сердечно-сосудистой системы. Своевременная диагностика ИНАН — единственный надежный способ контроля заболевания. Для этой цели предложены различные серологические и молекулярно-генетические методы. Серологические методы исследования при ИНАН имеют определенные недостатки. С их помощью невозможно выявить больных животных до начала сероконверсии, кроме того, зарегистрированы случаи иммунодефицитного состояния лошадей, при котором вирусспецифические антитела образуются в количестве, недостаточном для их обнаружения. В настоящей работе представлены данные по сравнительной оценке различных серологических и молекулярно-генетических методов диагностики инфекционной анемии лошадей при экспериментальном воспроизведении инфекции у восприимчивого животного. Использовали соответственно реакцию диффузионной преципитации (РДП), иммуноферментный анализ (ИФА) и способы обнаружения фрагментов генома вируса ИНАН с помощью гнездовой ПЦР с этапом обратной транскрипции (ОТ-ПЦР) и электрофоретической детекцией, а также ОТ-ПЦР в режиме реального времени. Разработанные тест-системы для ПЦРдиагностики основаны на амплификации фрагментов gag-гена вируса ИНАН с использованием специфических олигонуклеотидных праймеров. При исследовании проб крови, взятой на 2-е сут после экспериментального заражения, получен положительный ответ в гнездовой ОТ-ПЦР с электорофоретической детекцией и в ОТ-ПЦР в режиме реального времени. Далее геном вируса ИНАН выявлялся методом ОТ-ПЦР до конца срока наблюдения, составлявшего 35 сут. Специфические антитела в сыворотке крови обнаруживали методом РДП, начиная с 30-х, ИФА — с 21-х сут после инфицирования. Таким образом, ПЦР можно эффективно применять в качестве специфичного экспресс-метода для выявления генома вируса ИНАН в период до начала сероконверсии с последующей верификацией другими лабораторно-диагностическими методами. Для предлагаемых отечественных тест-систем и рекомендованных методик исследования подтверждены преимущества использования ПЦР-диагностики на ранних сроках заболевания ИНАН.

• Герасимова Н.Н
• Колбасов Д.В.
• Цыбанов С.Ж.
• Луницин А.В.
• Колбасова O.Л.

• Искусство. Декоративно-прикладное искусство. Фотография. Музыка. Игры. Спорт

• Естественные науки
• Сельское хозяйство. Лесоводство