Каталитические свойства и стабильность рекомбинантной пероксидазы табака с заменой ILe37Met
Методом направленного мутагенеза получена мутантная пероксидаза табака (ТОР) с заменой ILe37Met. Данная мутация имитировала пероксидазу сои, в которой остаток Met37 отвечает за повышенную стабильность. Мутантная ТОР ILe37Met экспрессировалась в клетках E. coli BL21 (DE3) CodonPlus в виде нерастворимых телец включения. Уровень экспрессии составил более 40% от общего белка клетки. Активный фермент получали с помощью рефолдинга по методике, разработанной для рекомбинантной пероксидазы табака дикого типа. Были исследованы субстратная специфичность, каталитическая активность и термостабильность мутантной ТОР ILe37Met. Показано, что введение данной мутации приводит не к увеличению стабильности фермента, а к снижению его каталитических свойств.
Авторы
Тэги
Тематические рубрики
Предметные рубрики
В этом же номере:
Резюме по документу**
Методом направленного мутагенеза получена мутантная пероксидаза табака (ТОР) с заменой ILe37Met. <...> Данная мутация имитировала пероксидазу сои, в которой остаток Met37 отвечает за повышенную стабильность. <...> Мутантная ТОР ILe37Met экспрессировалась в клетках E. coli BL21 (DE3) CodonPlus в виде нерастворимых телец включения. <...> Уровень экспрессии составил более 40% от общего белка клетки. <...> Активный фермент получали с помощью рефолдинга по методике, разработанной для рекомбинантной пероксидазы табака дикого типа. <...> Были исследованы субстратная специфичность, каталитическая активность и термостабильность мутантной ТОР ILe37Met. <...> Показано, что введение данной мутации приводит не к увеличению стабильности фермента, а к снижению его каталитических свойств. <...> Методом направленного мутагенеза получена мутантная пероксидаза табака (ТОР) с заменой ILe37Met. <...> Данная мутация имитировала пероксидазу сои, в которой остаток Met37 отвечает за повышенную стабильность. <...> Мутантная ТОР ILe37Met экспрессировалась в клетках E. coli BL21 (DE3) CodonPlus в виде нерастворимых телец включения. <...> Уровень экспрессии составил более 40% от общего белка клетки. <...> Активный фермент получали с помощью рефолдинга по методике, разработанной для рекомбинантной пероксидазы табака дикого типа. <...> Были исследованы субстратная специфичность, каталитическая активность и термостабильность мутантной ТОР ILe37Met. <...> Показано, что введение данной мутации приводит не к увеличению стабильности фермента, а к снижению его каталитических свойств. <...>
** - вычисляется автоматически, возможны погрешности
Похожие документы: