ОСОБЕННОСТИ ПЕРЕНОСА ГЕНА В МЕЗЕНХИМНЫЕ СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИ
Мезенхимные стволовые клетки мыши маркировали при помощи лентивирусных векторов, несущих ген зеленого белка (eGFP) под промотором SFFV и без него, в длительной культуре костного мозга. Изучали функционирование маркированных мезенхимных стволовых клеток в стромальном подслое длительной культуры костного мозга и в очагах эктопического кроветворения, образованных под капсулой почки сингенных мышей подслоями маркированных культур. Анализировали частоту маркированных полипотентных стромальных клетокпредшественников (КОЕ фибробластов) в подслоях длительной культуры и в очагах эктопического кроветворения, сформированных из этих подслоев. Показано, что при использовании лентивектора, содержащего ген eGFP без промотора, пропорция маркированных КОЕ фибробластов в очагах эктопического кроветворения повышается почти в 10 раз. Экспрессия зеленого белка приводит к отторжению маркированных стромальных клеток. Использование вектора с eGFP без промотора позволяет длительное время следить за функционированием маркированных мезенхимных стволовых клеток.
Авторы
Тэги
Тематические рубрики
Предметные рубрики
В этом же номере:
Резюме по документу**
ОСОБЕННОСТИ ПЕРЕНОСА ГЕНА В МЕЗЕНХИМНЫЕ
СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИ <...> Н.В.Cац, И.Н.Шипунова, А.Е.Бигильдеев, Д.С.Костюшев, Н.И.Дризе
ФГБУ Гематологический научный центр Минздрава РФ, Москва
Мезенхимные стволовые клетки мыши маркировали при помощи лентивирусных векторов, несущих ген зеле
ного белка (eGFP) под промотором SFFV и без него, в длительной культуре костного мозга. <...> Изучали функцио
нирование маркированных мезенхимных стволовых клеток в стромальном подслое длительной культуры
костного мозга и в очагах эктопического кроветворения, образованных под капсулой почки сингенных мышей
подслоями маркированных культур. <...> Анализировали частоту маркированных полипотентных стромальных клеток
предшественников (КОЕ фибробластов) в подслоях длительной культуры и в очагах эктопического кроветворе
ния, сформированных из этих подслоев. <...> Показано, что при использовании лентивектора, содержащего ген eGFP
без промотора, пропорция маркированных КОЕ фибробластов в очагах эктопического кроветворения повыша
ется почти в 10 раз. <...> Экспрессия зеленого белка приводит к отторжению маркированных стромальных клеток. <...> Ключевые слова: стволовые мезенхимные клетки, колониеобразующие единицы фибробластов, ленти
вектор, очаг эктопического кроветворения, длительная культура костного мозга
Генетическое маркирование мезенхимных ство
ловых клеток (МСК) открывает новые возмож
ности для изучения стволовых клеток стромы. <...> С другой стороны, мышиные МСК, маркирован
ные геном eGFP in vitro, способны к переносу
кроветворного микроокружения в очаге эктопи
ческого кроветворения [9]. <...> По предварительным
данным, в очагах эктопического кроветворения,
образованных МСК, маркированными eGFP с
активным промотором, маркерный ген выявлял
ся в небольшом проценте КОЕ фибробластов
(КОЕФ), при этом в КОЕФ под флюоресцентным
микроскопом никогда не обнаруживались eGFP
положительные светящиеся клетки. <...> Было пред
положено, что в организме выживали <...>
** - вычисляется автоматически, возможны погрешности
Похожие документы: