ПОЛУЧЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ ПРОТИВ ГЛИКОПРОТЕИНА ВИРУСА ЭБОЛЫ
Проведена иммунизация мышей BALB/с рекомбинантным гликопротеином вируса Эбола. В результате селекции и клонирования мышиных гибридом получено пять генетически стабильных клонов моноклональных антител GPE118 (IgG), GPE274 (IgM), GPE325 (IgM), GPE463 (IgM) и GPE534 (IgG). Проведены выделение и очистка указанных антител из асцитной жидкости мышей линии BALB/с с использованием аффинной хроматографии на сорбенте белок G-сефарозе (для IgG) и методом преципитации эуглобулинов (для IgM). Проведен иммунохимический анализ эпитопной специфичности выделенных антител с целью отбора не менее трех из них в качестве компонентов комбинированного терапевтического средства для профилактики и лечения геморрагической лихорадки. Из данных иммуноблоттинга и сэндвич-ИФА следует, что эпитоп, узнаваемый GPE 534, отличается от эпитопов, узнаваемых моноклональными антителами GPE 118 и GPE 325. Последние два антитела также различаются по эпитопной специфичности, о чем свидетельствуют данные иммуноблоттинга и характер взаимодействия указанных антител с интактным и окисленным (частично дегликозилированным) рекомбинантным гликопротеином. Для исследования биологической активности и разработки на их основе рекомбинантных продуктов выбраны три кандидатных высокоаффинных моноклональных антитела — GPE 534, GPE 118 и GPE 325.
Авторы
Тэги
Тематические рубрики
Предметные рубрики
В этом же номере:
Резюме по документу**
1
ИММУНОЛОГИЯ
УДК 57.083.3
ПОЛУЧЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ
ПРОТИВ ГЛИКОПРОТЕИНА ВИРУСА ЭБОЛЫ
О.Б. <...> Г. Свешников1
1 Всероссийский научный центр молекулярной диагностики и лечения;
Россия, 117638, Москва, Симферопольский бульвар, д. <...> * e-mail: ta12345@list.ru
Проведена иммунизация мышей BALB/с рекомбинантным гликопротеином вируса
Эбола. <...> Проведены выделение и очистка указанных
антител из асцитной жидкости мышей линии BALB/с с использованием аффинной
хроматографии на сорбенте белок G-сефарозе (для IgG) и методом преципитации эуглобулинов
(для IgM). <...> Проведен иммунохимический анализ эпитопной специфичности выделенных
антител с целью отбора не менее трех из них в качестве компонентов комбинированного
терапевтического средства для профилактики и лечения геморрагической
лихорадки. <...> Из данных иммуноблоттинга и сэндвич-ИФА следует, что эпитоп, узнаваемый
GPE 534, отличается от эпитопов, узнаваемых моноклональными антителами GPE
118 и GPE 325. <...> Последние два антитела также различаются по эпитопной специфичности,
о чем свидетельствуют данные иммуноблоттинга и характер взаимодействия указанных
антител с интактным и окисленным (частично дегликозилированным) рекомбинантным
гликопротеином. <...> Ключевые слова: вирус Эбола, гликопротеин вируса Эбола, гибридома, моноклональные
антитела, мыши линии BALB/с, непрямой ИФА, сэндвич-ИФА, иммуноблоттинг. <...> Впервые вирус Эбола (EBOV) появился в 1976 г.
в Судане и Демократической республике Конго
(в то время — Заир). <...> Использование отдельных моноклональных антител (МоАт) или антител, полученных из крови выживших больных, давало неустойчивые результаты [7–9]. <...> В процессе получения и исследования на модельных животных различных МоАт против GP росло понимание того, что только комбинация антител, специфичных к различным эпитопам, может обеспечить защитный эффект и снизить летальность. <...> Целью настоящей работы стало получение новых оригинальных МоАт против рекомбинантного GP, их иммунохимическая <...>
** - вычисляется автоматически, возможны погрешности
Похожие документы: