11S АКТИВАТОР ПРОТЕАСОМЫ: ВЫДЕЛЕНИЕ ИЗ МОЗГА МЫШЕЙ И ВЛИЯНИЕ НА ГИДРОЛИЗ ПЕПТИДНЫХ СУБСТРАТОВ 20S И 26S ПРОТЕАСОМОЙ
Оптимизирована методика выделения регуляторной субчастицы протеасомы 11S из гомогената мозга мыши; определен субъединичный состав выделенного белка. Изучена зависимость скорости гидролиза модельного субстрата Suc-Leu-Leu-ValTyr-AMC от мольного соотношения регуляторного белка 11S к протеасоме 20S. Определены константы Михаэлиса протеасомы 20S из головного мозга мышей линии BALB/c и комплекса протеасомы 20S с регуляторным белком 11S по специфическим флуоресцентным субстратам Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC, Ac-Arg-Leu-Arg-AMC, Z-Leu-Leu-Glu-AMC. Показано, что 11S-субчастица практически не влияет на связывание специфических флуоресцентных пептидных субстратов протеасомой 20S, но значительно увеличивает скорость гидролиза по всем трем субстратам, при этом не изменяет скорость гидролиза пептидного субстрата протеасомой 26S. Ключевые слова: протеасома, регулятор протеасомы 11S, активность протеасомы, субъединичный состав.
Авторы
Тэги
Тематические рубрики
Предметные рубрики
В этом же номере:
Резюме по документу**
2
УДК 577.122.2
11S АКТИВАТОР ПРОТЕАСОМЫ: ВЫДЕЛЕНИЕ ИЗ МОЗГА
МЫШЕЙ И ВЛИЯНИЕ НА ГИДРОЛИЗ ПЕПТИДНЫХ
СУБСТРАТОВ 20S И 26S ПРОТЕАСОМОЙ <...> А.В. Бачева, О.В. Коробкина, П.С. Нестерова, В.А. Крячков, А.Г. Габибов*
(кафедра химии природных соединений химического факультета
Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова;
e-mail: anbach@genebee.msu.ru)
Оптимизирована методика выделения регуляторной субчастицы протеасомы 11S
из гомогената мозга мыши; определен субъединичный состав выделенного белка. <...> Изучена зависимость скорости гидролиза модельного субстрата Suc-Leu-Leu-ValTyr-AMC
от мольного соотношения регуляторного белка 11S к протеасоме 20S. <...> Определены константы Михаэлиса протеасомы 20S из головного мозга мышей линии
BALB/c и комплекса протеасомы 20S с регуляторным белком 11S по специфическим
флуоресцентным субстратам Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC, Ac-Arg-Leu-Arg-AMC,
Z-Leu-Leu-Glu-AMC. <...> Показано, что 11S-субчастица практически не влияет на связывание
специфических флуоресцентных пептидных субстратов протеасомой 20S,
но значительно увеличивает скорость гидролиза по всем трем субстратам, при этом
не изменяет скорость гидролиза пептидного субстрата протеасомой 26S. <...> В
клетке протеасома работает в комплексе со специальными
регуляторными белками, которые, присоединяясь
к основной субъединице, открывают
белкам доступ в протеолитическую камеру и могут
оказывать влияние на каталитические свойства
всего фермента. <...> Один из таких регуляторов
– субчастица 19S, обладающая АТФазной активностью
и сайтом узнавания убиквитина. <...> Кроме субчастиц 19S
эукариотические клетки содержат другие регуляторные
частицы (PA28, PA200, PI31), которые
могут взаимодействовать с протеасомой 20S,
тем самым формируя альтернативные формы протеасомы. <...> Многие из этих белков
влияют на протеолитическую активность протеасомы,
но в отличие от 19S эти альтернативные
регуляторы не являются ATPазами и не имеют сайтов
связывания поли-убиквитиновых цепей, т.е. <...> Семейство регуляторов PA28 (proteasome
activator of apparent subunit <...>
** - вычисляется автоматически, возможны погрешности
Похожие документы: