РУАЭСТ (RUAEST)
УСИЛЕНИЕ ИММУННОГО ОТВЕТА ПРИ СОЧЕТАННОМ ВВЕДЕНИИ РЕКОМБИНАНТНЫХ ДНК И БЕЛКОВ РЕПЛИКАТИВНОГО КОМПЛЕКСА ВИРУСА ГЕПАТИТА С
Перспективным подходом к созданию вакцин против гепатита С является разработка конструкций на базе нуклеотидных последовательностей вируса гепатита С (ВГС), однако оптимальный состав вакцинной композиции не определен. Цель работы состояла в оценке эффективности иммунного ответа при сочетанном введении мышам ДНК-конструкции pcNS3-NS5B, кодирующей белки репликативного комплекса, и рекомбинантных неструктурных белков NS3 и NS5B ВГС с использованием различных адъювантов. Мышей DBA иммунизировали ДНК-конструкцией и/или рекомбинантными белками троекратно. Гуморальный иммунный ответ оценивали в ИФА, клеточный – по анализу уровня пролиферации лимфоцитов в реакции бласттрансформации in vitro, по синтезу и секреции цитокинов IFN-γ и IL-2 методами ELISpot и ИФА. Показано, что плазмида pcNS3-NS5B вызывает преимущественно Т-клеточный ответ, тогда как NS3 и NS5B стимулируют сильный гуморальный иммунный ответ. Впервые установлено принципиальное преимущество комбинированной вакцинации животных ДНК-конструкцией pcNS3-NS5B в сочетании с белками NS3 и NS5B ВГС: статистически значимо усиливается как гуморальный, так и клеточный иммунный ответ. При этом стимулируется иммунный ответ не только к введенным белкам NS3 и NS5B, но также и к другим антигенам, кодируемым плазмидой pcNS3-NS5B (NS4, NS5A). Наиболее интенсивный иммунный ответ получен при троекратном совместном введении ДНК-конструкции pcNS3-NS5B с генным адъювантом pcGM-CSF в сочетании с рекомбинантными белками NS3 и NS5B ВГС, введенными с IFN-a. Адъювантная активность рекомбинантного белка IFN-alpha, впервые показанная на модели генов и белков ВГС, может служить предпосылкой для включения его в кандидатный вакцинный препарат.